Effect of somatotropin on survival and diameter of bovine preantral follicles / Efeito da somatotropina na sobrevivência e no diâmetro de folículos pré-antrais de bovinos

The aim of this study was to evaluate the effect of Recombinant bovine somatotropin (rbST) on survival and diameter of bovine preantral ovarian follicles (PAOF) cultured in vitro. Ovaries were collected from adult cows and fragments of ovarian cortex were immediately fixed (non-cultured control) or cultured in vitro in α-MEM+ alone or containing 10, 50, 100 or 1,000ng/mL rbST. The fragments were processed for Classical Histology and Transmission Electron Microscopy. After one and seven days of culture, the percentage of normal follicles in the non-cultured control was superior (P< 0.05) to the follicles cultured in α-MEM+ alone or with different rbST concentrations. The oocyte and follicular mean diameter did not increase during the culture for one and seven days, both in media containing rbST and in the medium without this hormone. The only medium in which there was no reduction in follicular diameter with the time of culture was the medium without rbST. Ultrastructural damage in PAOF cultured in vitro was found. It is concluded that the use of rbST at different concentrations in in situ culture of bovine preantral follicles has no beneficial effects on survival and growth of bovine PAOF.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre a sobrevivência e o diâmetro de folículos ovarianos pré-antrais (FOPA) bovinos cultivados in vitro. Ovários foram coletados de vacas adultas e fragmentos do córtex ovariano foram imediatamente fixados (controle não cultivado) ou cultivados in vitro em α-MEM + sozinho ou contendo 10, 50, 100 ou 1.000ng/mL de rbST. Os fragmentos foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Após um e sete dias de cultivo, o percentual de folículos normais no controle não cultivado foi superior (P<0,05) aos cultivados em α-MEM + sozinho ou acrescido de diferentes concentrações de rbST. Os diâmetros médios oocitário e folicular não aumentaram durante o cultivo por um e sete dias, tanto nos meios contendo rbST, como no meio sem esse hormônio (α-MEM + ). O único meio em que não houve redução no diâmetro folicular com o tempo de cultivo foi o sem rbST. Verificaram-se ainda danos ultraestruturais em FOPA cultivados in vitro. Conclui-se que o uso de rbST em diferentes concentrações no cultivo in situ de folículos pré-antrais bovinos não tem efeitos benéficos na sobrevivência e no crescimento de FOPA bovinos.(AU)

Interval in the replacement of in vitro culture medium affects the integrity and development of equine preantral follicles / Intervalo na substituição do meio de cultivo in vitro afeta a integridade e o desenvolvimento de folículos pré-antrais equinos

The efficiency of a culture system is related to the elaboration and replacement of a medium with conditions suitable for follicular development. Recent investigations suggested that in vitro culture medium should be replaced after specific time periods in various species. However, the suitable interval for the exchange of in vitro culture medium has not yet been established in equine species. The objective of this investigation was to evaluate the effect of medium exchange intervals of 24 hours (T24) or 48 hours (T48) for in vitro culture of preantral follicles at 2 or 6 days. At the end of the culture period, the fragments were processed using classical histology. Equine preantral follicles were classified according to morphological integrity and developmental stage. Data analysis was performed using Fisher's test with a significance level of p<0.05. Out of a total of 399 follicles evaluated, 174 (43.6%) were primordial follicles, 225 (56.4%) were in development, and 63.76% were morphologically intact. In the in vitro culture performed over two days, there was no significant difference in relation to follicular integrity after medium replacement (p>0.05). Compared to the medium replacement at six days of culture, there was a statistically significant difference for T24 (68.9%, p<0.05). Therefore, we suggest changing the medium for equine species at 48 hours after the start of culture followed by subsequent daily replacements.(AU)

A eficiência de um sistema de cultivo está relacionada à elaboração e substituição do meio de cultivo com condições adequadas ao desenvolvimento folicular. Pesquisas recentes sugerem que o meio de cultivo in vitro deve ser substituído após períodos de tempo específicos para várias espécies. No entanto, o intervalo adequado para a troca de meio de cultivo in vitro ainda não foi estabelecido na espécie equina. O objetivo desta investigação foi avaliar o efeito de intervalos de troca média de 24 horas (T24) ou 48 horas (T48) para cultivo de folículos pré-antrais aos 2 ou 6 dias. No final do período de cultivo, os fragmentos foram processados ​​usando histologia clássica. Os folículos pré-antrais equinos foram classificados de acordo com a integridade morfológica e o estágio de desenvolvimento. A análise dos dados foi realizada utilizando o teste de Fisher com um nível de significância de p<0,05. De um total de 399 folículos avaliados, 174 (43,6%) foram folículos primordiais, 225 (56,4%) estavam em desenvolvimento e 63,76% estavam morfologicamente intactos. No cultivo in vitro realizado ao longo de dois dias, não houve diferença significativa em relação à integridade folicular após a substituição do meio (p>0,05). Comparado com a substituição média aos seis dias de cultivo, houve diferença estatisticamente significativa para T24 (68,9%, p<0,05). Portanto, sugerimos alterar o meio para as espécies equinas às 48 horas após o início da cultura, seguindo as subsequentes substituições diárias.(AU)

Short-term preservation of Pecari tajacu ovarian preantral follicles using phosphate buffered saline (PBS) or powdered coconut water (ACP(r)) media / Preservação de folículos ovarianos pré-antrais de Pecari tajacu por curtos períodos utilizando meios à base de solução salina fosfatada tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r))

We compare protocols for the short-term preservation of collared peccarie's ovarian preantral follicles (PFs) by using phosphate buffered saline- (PBS) or powdered coconut water- (ACP(r)) based medium. For morphology analysis each pair of ovaries collected from six females was divided into nine fragments. One fragment was destined for morphology analysis (histology and transmission electron microscopy - TEM), constituting the control group and the other fragments were placed in tubes with PBS or ACP(r), packed in 5 L Styrofoam boxes, stored for 4h, 12h, 24h, and 36h, and then analyzed. For viability analysis a pair of ovaries from two additional females was divided into nine fragments; one fragment was immediately destined for viability analysis (Trypan blue test) and the other fragments were stored as previously described, until 24h and then analyzed. After 4h storage in ACP(r) medium, the follicular integrity was similar to control (87.8% vs 94.4%, respectively); however, ultrastructural analyses revealed swollen mitochondria as the first signals of PF degeneration. It was observed that ACP(r) (66.7%) was more efficient than PBS (49.4%) to preserve the morphological integrity after 36h storage (P<0.05); however, no differences were observed on follicular viability (P>0.05). In conclusion, the use of the ACP(r) is recommended for the short-term preservation of Pecari tajacu preantral follicles...

Compararam-se protocolos para a preservação por curtos períodos de folículos ovarianos pré-antrais (PFs) de catetos, utilizando meios à base de solução salina tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r)). Para a análise morfológica, cada par de ovários coletados de seis fêmeas foi dividido em nove fragmentos. Um fragmento foi destinado para a análise da morfologia (histologia e microscopia eletrônica de transmissão - MET), constituindo o grupo controle, e os demais fragmentos foram colocados em tubos contendo PBS ou ACP(r), acondicionados em caixas térmicas de poliestireno expandido de 5L, armazenados durante quatro, 12, 24 e 36 horas, e, então, analisados. Para a análise da viabilidade, pares de ovários de duas fêmeas adicionais foram divididos em nove fragmentos; um deles foi imediatamente destinado à análise da viabilidade (teste com azul de Trypan), os outros fragmentos foram armazenados como descrito previamente até 24h e, então, foram analisados. Após quatro horas de armazenamento em meio ACP(r), a integridade folicular foi similar ao grupo controle (87,8% vs. 94,4%, respectivamente); contudo, a análise ultraestrutural revelou mitocôndrias edemaciadas como os primeiros sinais de degeneração dos PFs. Foi observado que o ACP(r) (66,7%) foi mais eficiente do que o PBS (49.4%) em preservar a integridade morfológica após 36h (p<0,05); entretanto, nenhuma diferença foi observada para a viabilidade folicular (P>0,05). Em conclusão, o uso da ACP(r) é recomendado para a preservação por curtos períodos de folículos pré-antrais de Pecari tajacu...

Influence of Insulin-like Growth Factor I (IGF-I) on the survival and the in vitro development of caprine preantral follicles / Influência do Fator de Crescimento Semelhante à Insulina-I (IGF-I) sobre a sobrevivência e o desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos

The aim of this study was to investigate the effects of the insulin-like growth factor -I (IGF-I) on survival, activation (transition from primordial to primary follicles) and growth of caprine preantral follicles cultured in vitro. Fragments of ovarian cortex were cultured for one and seven days in the absence or presence of IGF-I (0, 50 and 100ng/ml). The non-cultured and cultured tissues were processed and analyzed by histology and transmission electron microscopy. The culture for one day in a medium with 100ng/ml of IGF-I showed 86.7% of morphologically normal follicles. These results were similar (P>0.05) to the percentage of normal follicles found in the control (96.7%). It was also found that this medium increased the percentage of follicular activation (developing follicles) with one day of culture. The oocyte and follicular diameters remained similar to the control by culturing for one day in a medium containing 100ng/ml of IGF-I. The ultrastructural analysis did not confirm the integrity of the follicular fragments in a medium containing IGF-I (100ng/ml) after one and seven days of culture. In conclusion, this study demonstrated that the addition of 100 ng/ml of IGF-I in the culture medium enables the development of preantral follicles of goats with one day of culture. However, it is not sufficient to maintain the follicular integrity and the follicular survival rate after seven days of culture.

O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos do fator de crescimento semelhante a insulina-I (IGF-I) na sobrevivência, ativação (transição de folículos primordiais para primários) e crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro. Fragmentos de córtex ovariano foram cultivados por um e sete dias na ausência ou presença de IGF-I (0, 50 e 100ng/mL). Os tecidos não cultivados e cultivados foram processados e analisados por histologia e microscopia eletrônica de transmissão. O cultivo por um dia em meio com 100ng/mL de IGF-I apresentou 86,7% de folículos morfologicamente normais. Estes resultados foram semelhantes (P>0,05) ao percentual de folículos normais encontrados no controle (96,7%). Verificou-se ainda que este meio aumentou o percentual de ativação folicular (folículos em desenvolvimento) com um dia de cultivo. Os diâmetros ovocitário e folicular mantiveram-se semelhantes ao controle ao cultivar por um dia em meio contendo 100ng/mL de IGF-I. As análises ultraestruturais não confirmaram a integridade folicular dos fragmentos em meio contendo IGF-I (100 ng/mL) após um e sete dias de cultivo. Em conclusão, esse estudo demonstrou que a adição de 100 ng/mL de IGF-I no meio de cultivo ativa o desenvolvimento de folículos pré-antrais de caprinos com um dia de cultivo. Entretanto, não é suficiente para manter a integridade folicular e a taxa de sobrevivência folicular após sete dias de cultivo.

Sphingosine 1-phosphate promotes activation of aprine preantral follicle in vitro / Esfingosina 1-fosfato promove ativação de folículos pré-antrais de caprinos in vitro

This study describes the effect of sphingosine 1-phosphate (S1P) for development of preantral follicle, therefore the activation and follicular viability of caprine follicles cultured in vitro. Ovarian fragments were cultured for 1 or 7 days in Minimum Essential Medium with different S1P concentrations (0, 1, 10, 50, 100 or 200ng/mL). All ovarian fragments were processed for histological analysis in optical microscopy, transmission electron microscopy and fluorescence analysis. The treatment using 1ng/mL of S1P was able to maintain the percentage of normal follicles with the progression of the culture from day 1 to 7. At end of the 7-day culture period there was a significant reduction (P<0.05) in the percentage of primordial follicles in all groups treated with S1P, compared with fresh control (FC) and Control Culture (CC), which was followed by an increase of activated follicles (intermediary, primary and secondary). In addition, the culture for 7 days with media supplemented with S1P with 1ng/mL preserved the ultrastructure of organelles and kept the preantral follicular viability when evaluated by fluorescence microscopy. In conclusion, after 7 days of culture, the 1ng/mL of S1P activates the development of preantral caprine follicles, cultured in situ and maintains the oocitary and follicular viability...

Este estudo descreve o efeito da esfingosina 1-fosfato (S1P) no desenvolvimento de folículos pré-antrais, portanto da ativação e viabilidade de folículos caprinos cultivados in vitro. Fragmentos de ovários foram cultivados por um ou sete dias em meio essencial mínimo com diferentes concentrações de S1P (0, 1, 10, 50, 100 ou 200ng/mL). Os fragmentos de ovário foram processados para análise histológica em microscopia óptica, microscopia eletrônica e microscopia de fluorescência. O tratamento usando 1ng/mL de S1P foi capaz de manter a porcentagem de folículos normais durante o período de cultivo de sete dias. Ao final do período de cultivo, houve uma redução significativa (p<0,05) na porcentagem de folículos primordiais em todos os grupos tratados com S1P, comparados com os grupos controle (FC e CC), seguida por um aumento do número de folículos ativados (intermediários, primários e secundários). Adicionalmente, na cultura por sete dias com meio suplementado com S1P (1ng/mL), houve preservação da ultraestrutura das organelas e manteve-se a viabilidade dos folículos pré-antrais avaliados por microscopia de fluorescência. Em conclusão, após sete dias de cultura, o meio suplementado com 1ng/mL de S1P ativa o desenvolvimento de folículos pré-antrais de caprino, cultivados in situ e mantém as viabilidades oocitária e folicular...

Association between insulin-like growth factor-I, thyroxine and follicle stimulating hormone on the survival and in vitro development of caprine preantral follicles / Associação entre fator de crescimento semelhante à insulina-I, tiroxina ehormônio folículo estimulante sobre a sobrevivência e o desenvolvimentoin vitro de folículos pré-antrais caprinos

O objetivo deste estudo foi investigar a influência da interação entre o Hormônio Folículo Estimulante obtido da pituitária Humana (hFSH; 10 ng/mL), Fator de Crescimento Semelhante a Insulina Tipo 1 (IGF-I; 100 ng/mL) e Tiroxina (T4 ; 10, 20 ng/mL) na sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais cultivados in vitro. Fragmentos do córtex ovariano coletados a partir de 17 cabras adultas não gestantes foram submetidos a diferentes tratamentos que incluíam meio α-MEM+, IGF-I, hFSH, T4 e em seguida foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados demonstraram uma redução no percentual de folículos normais, após um e sete dias de cultivo nos meios α-MEM+ (controle cultivado), T4 (10)/IGF-I, T4 (20)/IGF-I/hFSH e nos meios α-MEM+, IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, quando comparados ao controle não cultivado. Entretanto, o meio contendo T4 (20)/hFSH apresentou taxa de sobrevivência folicular superior aos demais tratamentos, quando cultivado por sete dias. Observou-se, ainda, que o diâmetro folicular quando cultivado neste meio não se alterou, quando comparado ao controle (não cultivado). As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados em meio contendo T4 (20)/hFSH. Em conclusão, o meio com T4 (20)/hFSH apresentou os melhores resultados, quando se avaliou sobrevivência, crescimento e aspectos ultraestruturais de folículos pré-antrais de caprinos cultivados in vitro.

The aim of this study was to investigate the influence of the interaction between follicle stimulating hormone obtained from Human Pituitary (hFSH; 10 ng/mL), Insulin-like Growth Factor Type 1 (IGF-I; 100 ng/mL) and thyroxine (T4 ; 10, 20 ng/mL) on survival, activation and growth of preantral follicles (PAF) cultured in vitro. Fragments of ovarian cortex collected from 17 nonpregnant adult goats underwent different treatments that included α-MEM+ medium, IGF-I, hFSH, T4 and were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The results showed a reduction in the percentage of normal follicles, after one and seven days of culture in media α-MEM+ (cultured control), T4 (10)/IGF-I, T4 (20)/IGF-I/hFSH and in media α-MEM+, IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, when compared to the non-cultured control. However, the medium containing T4 (20)/hFSH showed a follicular survival rate higher than the other treatments, when cultured for seven days. It was also observed that the follicular diameter did not change when cultured in this medium, when compared to the control (non-cultured). The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured in a medium containing T4 (20)/hFSH. In conclusion, the medium containing T4 (20)/hFSH showed the best results, when evaluating the survival, growth and ultrastructural aspects of caprine preantral follicles cultured in vitro.

Goat ovarian follicles express different levels of mRNA for inhibin-ßA subunit and activin-A stimulates secondary follicle growth in vitro / Folículos ovarianos caprinos expressam diferentes níveis de RNAm para subunidade ßA da inibina e ativina-A promove o crescimento de folículos secundários in vitro

This study investigated the levels of messenger ribonucleic acids (mRNA) for inhibin-ßA subunit in goat primordial, primary and secondary follicles, as well as in cumulus-oocyte complexes (COCs) and mural granulosa / theca cells of antral follicles. The effects of activin-A (100ng mL-1) and/or follicle stimulating hormone (FSH, 50ng mL-1) on growth and expression of mRNA for activin-A and FSH receptor (FSH-R) in secondary follicles cultured for six days were evaluated. The data showed that the expression of inhibin-ßA is lower in secondary follicles than in primary follicles and is higher in large antral follicles than in small antral follicles. After culture, activin-A and/or FSH promoted growth of secondary follicles, while FSH increased the levels of mRNA for inhibin-ßA, and activin-A increased the levels of FSH-R mRNA. In conclusion, mRNA for inhibin-ßA is expressed at different levels in pre-antral and antral follicles and activin-A acts as a stimulator of the FSH-R expression in goat follicles. On its turn, the expression of inhibin-ßA is stimulated by FSH, which together with activin-A promotes secondary follicle growth in-vitro.

Este estudo investigou os níveis de ácidos ribonucleicos (RNAm) para a subunidade ßA da inibina em folículos primordiais, primários e secundários caprinos, bem como em complexos cumulus-oócitos (CCOs) e células da granulosa mural/teca de folículos antrais. Além disso, avaliaram-se os efeitos da ativina-A (100ng mL-1) e/ou hormônio folículo estimulante (FSH, 50ng mL-1) sobre o crescimento e a expressão do RNAm para inibina-ßA e receptores de FSH (FSH-R) em folículos secundários cultivados por seis dias. Os dados mostraram que a expressão de inibina-ßA é menor em folículos secundários do que em folículos primários e é maior em grandes folículos antrais que nos pequenos folículos antrais. Após o cultivo, ativina-A e/ou FSH promoveram o crescimento de folículos secundários. Enquanto o FSH aumentou os níveis de RNAm para inibina-ßA, a ativina-A aumentou os níveis de RNAm para FSH-R. Em conclusão, a inibina-ßA é expressa em diferentes níveis em folículos pré-antrais e antrais e a ativina-A atua como um estimulador da expressão de FSH-R em folículos caprinos. Por sua vez, a expressão de inibina-ßA é estimulada pelo FSH, que, juntamente com ativina, promove o crescimento de folículos secundários in vitro.

Influência de diferentes concentrações de etileno glicol nO número de células da granulosa e morfometria de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano de Bos taurus indicus, Linnaeus, 1758 / Influence of different concentrations of the glycol in the number of granulosa cells and morphometry of the preantral ovarian follicles of Bos taurus indicus, Linnaeus, 1758

A criopreservação de folículos ovarianos pré-antrais pode ajudar na conservação de muitas espécies domésticas e selvagens. Neste trabalho, objetivou-se verificar o efeito do etileno glicol, em diferentes concentrações, na morfometria e número de células da granulosa de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano bovino. O teste de toxicidade foi realizado com fragmentos ovarianos expostos ao etileno glicol em concentrações de 10, 20 ou 40 por cento. O tecido foi analisado por técnica histológica clássica. Os folículos primordiais expostos à concentração de 40 por cento apresentaram redução do diâmetro folicular e ovocitário quando comparados ao grupo controle (sem exposição), 10 por cento e 20 por cento (P<0,05) e redução do número de células da granulosa quando comparados ao grupo controle (P<0,05). Com relação aos folículos primários, nenhum efeito foi observado (P>0,05). Esses resultados sugerem que folículos primários são mais resistentes aos efeitos do etileno glicol quando comparados aos primordiais.

The cryopreservation of the ovarian preantral follicles could help the conservation of several domestic and wild animal species. The objective of this study was to verify the effect of different concentrations of ethylene glycol on the morphometry and number of granulosa cells of the preantral ovarian follicles. A toxicity test was conducted with strips of ovarian cortex using ethylene glycol (10, 20 or 40 percent). Tissue analysis was done using classical histology techniques. The primordial follicles expose at a concentration of 40 percent showed reduction of the follicular diameter and oocyte when compared to the control (non exposing), 10 and 20 percent groups (P<0.05) and reduction in the number of granulosa cells compared to the control group (P<0.05). Regarding the primary follicles no alteration could be observed (P>0.05). These results suggest that primary follicles are more resistant to the effect of ethylene glycol when compared to primordial ones.

Effect of bone morphogenetic protein-7 (BMP-7) on in vitro survival of caprine preantral follicles / Efeito da proteína morfogenética óssea 7 (BMP-7) para a sobrevivência in vitro de folículos pré-antrais caprinos

This study was conducted in order to verify the effect of different concentrations of BMP-7 in the in vitro survival and development of caprine preantral follicles. Fragments of caprine ovarian cortical tissue were cultured for 1 or 7 days in Minimum Essential Medium (MEM+) supplemented with different concentrations of BMP-7 (1, 10, 50 or 100ng/ml). Non-cultured fragments or those cultured for 1 or 7 days were processed for classical histology and transmission electron microscopy (TEM). Parameters such as follicular survival, activation and growth were evaluated. The results showed that, after 1 or 7 days of culture, the percentage of morphologically normal follicles was significantly reduced in all treatments when compared with fresh control, except at 1ng/ml of BMP-7 for 1 day. In addition, the concentration of 10ng/ml of BMP-7 significantly increases follicular diameter from day 1 to 7 of culture. There was no influence of the other concentrations of BMP-7 regarding to the follicular and oocyte diameter. Ultrastructure studies confirmed follicular integrity after 7 days of culture in 1ng/ml BMP-7. In conclusion, small concentrations of BMP-7 can improve the survival and growth of caprine preantral follicles during in vitro culture.

O presente trabalho foi conduzido de modo a se verificar o efeito de diferentes concentrações da BMP-7 no desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos. Fragmentos de tecido cortical ovariano caprino foram cultivados por 1 ou 7 dias em Minimum Essential Medium (MEM+) suplementado com diferentes concentrações de BMP-7 (1, 10, 50 ou 100ng/ml). Os fragmentos não cultivados ou aqueles cultivados por 1 ou 7 dias foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (TEM), sendo avaliados parâmetros morfológicos indicativos de viabilidade, ativação e crescimento. Os resultados mostraram que o percentual de folículos morfologicamente normais diminuiu significativamente em todos os tratamentos quando comparados ao controle, exceto na concentração de 1ng/ml por 1 dia de cultivo. Já no D7 todos os tratamentos reduziram significativamente os percentuais de folículos morfologicamente normais. Utilizando 10ng/ml de BMP-7 foi observado um aumento significativo no diâmetro folicular quando comparados os diferentes períodos de cultivo. Não houve influência das demais concentrações de BMP-7 quando avaliados além do diâmetro folicular o diâmetro oocitário. A análise por TEM confirmou a integridade ultra-estrutural nos folículos após 7 dias de cultivo com 1ng/ml de BMP-7 . Em conclusão, o BMP-7 em baixas concentrações pode melhorar a sobrevivência e o crescimento durante o cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos.

Different Follicle-Stimulating Hormone (FSH) sources influence caprine preantral follicle viability and development in vitro / Diferentes origens do Hormônio Folículo Estimulante (FSH) influenciam a viabilidade e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos

The aim of this study was to evaluate the effects of pituitary (pFSH) or recombinant (rFSH) FSH on the survival and growth of caprine preantral follicles. Caprine ovarian tissues were in vitro cultured for one or seven days in Minimum Essential Medium (MEM) alone or containing 10, 50, 100 and 1000 ng/ml of pFSH or rFSH. Control tissues (non-cultured) and those cultured were processed for histological and ultrastructural studies. In addition, follicular and oocyte diameter were analysed. After seven days of culture, only 50ng/ml of rFSH maintained the percentage of normal follicles similar to control. Moreover, 10 ng/ml of pFSH and all the concentrations of rFSH promoted primordial follicles activation. In addition, the presence of 50 ng/ml of rFSH promoted the highest follicular diameter at day seven of culture. In conclusion, 50 ng/ml of rFSH maintained the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles, promoted primordial follicles activation and further growth of cultured follicles.

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do FSH pituitário (pFSH)ou recombinante (rFSH) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos pré-antrais caprinos. O tecido ovariano foi cultivado in vitro por um ou sete dias em Meio Essencial Mínimo (MEM) sozinho, ou contendo 10, 50, 100 e 1000 ng/ml de pFSH ou rFSH. O grupo controle (não cultivado) e aqueles cultivados foram processados para análises histológica e ultra-estrutural. Além disso, os diâmetros folicular e oocitário foram avaliados. Após sete dias de cultivo, apenas 50 ng/ml de rFSH manteve o percentual de folículos normais semelhante ao controle. Além disso, 10 ng/ml de pFSH e todas as concentrações de rFSH promoveram ativação de folículos primordiais. A presença de50 ng/ml de rFSH promoveu o maior diâmetro folicular após sete dias de cultivo. Em conclusão, 50 ng/ml de rFSH manteve a integridadede folículos pré-antrais caprinos e promoveu a ativação e o crescimento dos folículos cultivados.